血培养是诊断感染性心内膜炎的最重要方法。在近期未接受抗生素治疗的患者血培养阳性率可高达95%以上。对于未治疗的亚急性患者，应在第一日间隔1小时采血1次，共3次。如次日未见细菌生长，重复采血3次后开始抗生素治疗。已用过抗生素者，停药2~7天后采血。每次取静脉血10~20ml做需氧及氧菌培养，至少应培养3周。如有细菌生长需做药物敏感试验。