主要分为三步，参与的因子包括起始因子1-3，以及mRNA、转运tRNA、GTP等。

　　①30S亚基与mRNA的结合mRNA不能与完整的核糖体结合，但是能够同独立存在的30S核糖体小亚基结合。在原核生物中，30S核糖体小亚基通过16SrRNA与mRNA起始密码子AUG上游的SD序列的互补，从而与mRNA结合。核糖体小亚基与mRNA的结合还需要起始因子(initiationfactor.IF)的帮助，原核生物的起始因子命名为IFs，真核生物的起始因子命名为eIFs。原核生物有三种起始因子，其中有两种(IF1、IF3)通过与30S核糖体亚基的结合帮助30S亚基与mRNA的识别与结合。

　　②第一个aa-tRNA进入核糖体当mRNA与核糖体小亚基结合后，

　　携带甲酰甲硫氨酸的tRNA通过反密码子与mRNA中AUG的识别从而进入核糖体。起始tRNA在与mRNA形成mRNA-30S亚基复合物之前，必须同GTP、起始因子IF2结合，形成GTP-IF2-tRNAfMet复合物。起始tRNA复合物与mRNA的AUG密码子结合后，释放IF3。

　　③完整起始复合物的装配一旦起始tRNA与AUG密码子结合，核糖体大亚基就加入到复合物中形成完整的核糖体-mRNA起始复合物。该过程伴随GTP的水解、IF1和IF2的释放。其中GTP的水解可能引起核糖体构型的变化，而改变了的构型正是蛋白质合成所必需的。