利用氧化还原电位的高低测试呼吸链中各组分在内膜上的排列顺序和方向。即各组分在内膜呼吸链上的顺序与其得失电子的趋势有关，电子总是从低氧化还原电位向高氧化还原电位流动。氧化还原电位值愈低的组分供电子的倾向愈大，愈易成为还原剂而处于传递链的前面。在线粒体内膜呼吸链电子传递过程中，电子是按氧化还原电位从低向高传递。NAD＋/NADH的氧化还原电位值最低（E0＝－0.32V），O2/H2O的氧化还原电位值最高（E0＝＋0.82V）。