摘要：为了深入认识石油烃的厌氧降解过程，利用分子生物学技术分析了大庆油田采油废水处理系统厌氧池和进水中的微生物群落特征。基于DGGE和克隆文库的分析结果均表明，厌氧生物膜中存在的古菌源自于采油废水。厌氧生物膜和采油废水中的古菌主要是产甲烷菌，包括嗜甲基的Methanomethylovorans thermophila和利用氢和甲酸的Methanolinea tarda。值得注意的是，氢营养型的M. tarda在厌氧生物膜中得到了富集。进水和厌氧生物膜中的细菌群落结构明显不同。进水中的主要细菌类群为Epsilonproteobacteria，而生物膜中的主要类群为Nitrospira 和 Deltaproteobacteria。在厌氧生物膜中发现许多与产甲烷古菌（尤其是氢营养型产甲烷菌）协同降解石油烃类物质的细菌相关克隆：其中一个克隆与Syntrophus具有较高的同源性，该类菌是产甲烷菌介导的厌氧烃降解微生物区系中的关键细菌；许多Deltaproteobacteria克隆属于group TA类群，该类群细菌主要参与芳香族化合物产甲烷菌介导的厌氧降解过程。这些结果表明，在大庆油田采油废水厌氧处理系统中已经建立起由产甲烷菌所介导的厌氧石油烃降解的微生物区系。

采油废水是石油天然气开发过程中从地层中随原油一起开采出来的。含有原油的废水。采油废水主要成分是石油烃类物质，而且还溶入了许多随原油在地层中生成而形成的无机盐类。腐殖酸类。不同碳链的有机酸。多环芳烃。酚类和苯类物质。在油田，采油废水有时被直接回注到地层中或者排放到河流和地表。这对地层造成各种各样的损害。同时，由于石油烃类的毒性。致畸性和致癌性，排放到河流和地表未处理采油废水已成为一个非常重要的环境问题。因此，采油废水在进入环境前必须进行正确的处理。生物处理是一种经济有效的污水处理方法，已经成功地应用到采油废水的处理。。

国内现有采油废水处理工艺通常是物化处理后串联生物处理。一般来说，生物处理是保证废水最终达标排放的关键步骤，利用微生物的代谢作用，可以把废水中的石油成分和其他有机化合物降解去除。石油烃既能在好氧也可以在厌氧条件下被微生物降解。关于石油烃类的好氧生物降解已进行了广泛深入的研究。20世纪，80年代末发现石油烃的厌氧生物降解以来，研究发现，石油烃类物质能够通过多种途径在厌氧条件下被微生物分解利用，包括硫酸盐还原。硝酸盐还原甚至是产甲烷。

但总的来说，相对于烃的好氧降解，目前对于石油烃的厌氧生物降解过程仍知之甚少，尤其是对于实际的含油污水处理系统中的石油烃厌氧降解过程。大庆油田的采油废水处理系统由串联了厌氧K好氧单元构成，已经稳定运行多年，对总石油烃（TPH）。COP和多环芳烃(PHA)等都有很好的去除效果。该系统的厌氧处理单元也具有一定的石油烃类物质的去除能力。为了深入理解该系统的石油烃厌氧生物降解过程，本研究利用分子生物学手段对大庆油田的采油废水以及采油废水处理系统厌氧池中的古菌及细菌的群落进行了详细的解析。

1实验方法

1.1采样及水质分析

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